• 高分辨率小动物超声影像检测技术

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           该技术利用高频探头和强大的信号处理系统实现高分辨率,高穿透深度超声探测。可实现小动物实现机体深部影像的摄取、标示、实时和离线分析等。具有无创、实时、连续进行小动物活体结构及功能观察、精确测量及细微构造分析的特点。       检测分辨率可达30 μm,能清晰显示大、小鼠的微小解剖结构。实时心脏图像采集频率最高可达240帧/秒,能实时连续显示心动周期内心脏各部位的形态学改变。结合心电图采集分析和解剖M型超声技术,可实现左室心功能分析,有效实时记录心动周期内心脏各房/室形态结构的动态改变。特殊三维重组技术,可实现器官图像的三维重组,测量各个径向的尺寸。可进行如下检测内容:1:大、小鼠心脏功能检查:如室间隔、室壁厚度以及室壁运动参数的测量;血流速度和方向的测量等。2:肿瘤和其他组织结构的体积量化和测量:利用三维重建功能(3D Mode)实现器官图像的三维重组,并测量各个径向的尺寸。3:其它脏器,如肝、肾、膀胱、子宫等的探查。






    造模一周肿瘤(左),造模三周肿瘤(右)


    正常大鼠左室短轴(上),冠脉结扎大鼠心室短轴

    机能实验室

  • 液相蛋白芯片及细胞因子检测技术平台

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    分子生物学实验室
          Bio-Rad Bio-Plex 200悬浮芯片系统:该系统是一个功能强大的生物分析技术平台,可以用于蛋白或核酸检测,该系统将先进的软件包、系统检验工具、微球偶联试剂和即用型蛋白测试试剂整合在一起,为蛋白和核酸研究人员提供了灵活的复合式测试方案。与传统的采用ELISA、ELISpot分析方法进行单个细胞特定的细胞因子检测相比,Bio-Plex 200系统可以从一份样本中检测多种指标,实现了高通量、快速和定量一次完成来自人类、小鼠、大鼠和其他物种的多种分泌蛋白的检测,已经广泛应用于蛋白质的表达谱、蛋白质翻译后修,以及对蛋白质功能和相互作用的筛查的研究中。主要应用领域有各种疾病、生理过程的细胞因子表达谱分析、聚焦蛋白质组学(focused proteomics)研究、转化医学、病理与药理和新药筛选等。      目前本科室已应用液相蛋白芯片技术建立了一种适用于高通量、大样本、定量表征或描述多中药组分多靶点、多途径、网络化、整体协同作用的效果和细胞内调控机制研究技术平台。可规模化快速筛选中药有效抗炎成分和进行中药组分配伍有效复方研究。除此之外,该平台也适和应用于中药临床合理用药方案的优化和中药多组分在生物体内的量-时-效关系的研究等多种领域。


    BIO-PLEX液相蛋白芯片检测分析系统

    种属来源

    检测种类

    检测指标

    50

    细胞因子、趋化因子、生长因子

    12

    脂肪因子

    小鼠

    43

    细胞因子、趋化因子、生长因子

    9

    脂肪因子

    大鼠

    25

    细胞因子、趋化因子、生长因子

    5

    脂肪因子

    多种属

     

    TGF-beta、磷酸化蛋白和种靶蛋白检测

    特殊定制

     

    种属内可根据研究需要进行选择并定制


  • 质谱及蛋白质组学技术平台

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    分子生物学实验室
    全新的 ultrafleXtreme-MALDI质谱分子表型分析及表征系统,提供如下技术服务:1)蛋白质组学分析:通过二维凝胶电泳分离、Top-down策略(结合LC-MALDI)液相色谱分离的标记或非标肽段,对其进行鉴定和定量的研究,深度挖掘蛋白质组学数据。(结合安捷伦1260纳升液相分离系统及二维双向电泳分离系统实现)2)糖基化组学分析:完整糖链解析、确定混合样品中的N-糖基化、糖肽,图谱呈现糖肽MS/MS二级碎片离子峰,结合特定软件实现糖基化肽段结构解。3)完整蛋白准确分子量确定:采用肽指纹图谱技术仅需5s即可确定产物,质量准确度1ppm, 分辨率高达40000以上。4)蛋白N-端或C-端测序:根据碎片离子的单同位素峰的质量,从N端或C端起始可以测出多大90个AA的单同位素质量序列。
       




  • 基因芯片技术平台

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     本技术服务平台拥有美国Agilent微阵列高分辨率微阵列扫描系统,包括1)Agilent 2100 生物分析仪主要用于样本的质量控制,能够自动完成核酸、蛋白样品的定性、定量分析及RNA 分子完整性指数(RIN)评价,该仪器可在1- 2 min内同时完成1个样本的定性及定量分析,样品消耗量少,灵敏度高,分析结果同时以电泳图样以及峰值曲线格式呈现; 2)Thermo Fisher 超微量分光光度计,能够迅速获得对样品质量的了解,仅需要提供1-2 μL样本,数秒内便实现对DNA、RNA和蛋白样品的定量和定性分析并获得全光谱数据;3)Agilent生物芯片扫描仪是具有 24片装片器的扫描系统,能够读取1" x 3" 规格玻片微阵列,可以利用安捷伦图像分析采集软件和数据分析软件实现数据提取和分析的无缝连接; 4)ABI 7900 HT Q-PCR 是ABI公司推出的高通量实时荧光定量PCR系统,能够同时兼容96孔板和384孔板的荧光定量操作,能够满足从中通量到高通量实验的需求。
    提供服务项目包括:1) 核酸样本提取服务:提供不同来源total RNA及DNA 的提取服务,根据样本来源、取样方式、样品保存等因素控制样本处理流程,并提供样本质量检测数据;2)定量PCR服务: 提供mRNA及miRNA的定量PCR(qPCR)检测服务,仅需提供符合质量要求的0.5 μg以上的RNA样本,即可进行SYBR Green或TaqMan系统的qPCR检测;3)基因芯片服务:提供不同种属来源的多种样本的全基因表达谱、miRNA、LncRAN、SNP等芯片实验(RNA或DNA放大、标定芯片杂交),并利用Agilent Extended Dynamic Range技术读取并分析芯片杂交信号,增加可辨识的信号,提升芯片平台的灵敏度和专一性;以分析软件Rosetta Resolver 进行数据前处理,搭配统计学分析、功能分析资料库MetaCore 及Cytoscape 等分析软件,为客户提供各类数据分析服务。


    安捷伦基因芯片-微阵列扫描仪



    2100生物分析仪



    ABI7900HT荧光定量PCR
    分子生物学实验室

  • 科研用抗体制备技术:最先进的制备手段

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    (1)多色分析及分选仪器——BD FACSAria II       BD FACSAria II细胞高速分选仪融合了全新的设计理念和高度智能化的软件系统,使得多色分析和高速分选的操作高度自动化,在复杂的分选操作技术简单化的同时更保证了实验结果的准确性,高速分选的高效性。该设备细胞分选速度可达70,000细胞/秒,支持六根激光器和四个独立光斑。可选的激光器包括:633 nm, 561 nm, 488 nm, 445 nm, 405 nm和375nm。该设备还可同时进行20个参数、18色的检测,具有着强大的灵活性。



    2)BTX—ECM2001电融合仪       ECM2001是一台万能的细胞操作仪器,它综合了电穿孔仪和电融合仪的特点,ECM2001在细胞融合时,分三个阶段,预融合、融合、后融合阶段.ECM2001在预融合时可产生一种独特的高频交流波,交流波将细胞排列成双体或株琏,以便融合的进行,提高了融合的效率。


    (3)最灵敏的分子相互作用仪——Biacore T200 Biacore         T200表面等离子共振生物分子相互作用分析仪代表着当代分子间相互作用分析技术的科技前沿。它是一种万用的、无标记系统,具有高灵敏、分子所需量少、高通量等优点,是研究分子间相互作用的金标准设备,已广泛应用于蛋白质、核酸、多肽、小分子化合物等生物分子相互作用的研究之中。作为一种新的高端仪器,它可以实时地提供高质量动力学、亲和性、特异性、选择性以及热动力学作用数据,尤其是其分子量0道尔顿的检测下限可以涵盖所有药物小分子,具有其它仪器设备无法比拟的优势。


    免疫学实验室

  • 抗肿瘤药物药效的活体、实时、精确定量评价技术:高清晰度的发光细胞

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             IVIS-Lumina III活体成像技术(optical in vivo imaging)目前主要采用生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)两种技术,活体光学成像系统可应用于各类生物学研究、疾病模型和相关的药物研发过程,包括肿瘤(肿瘤的发展和转移/肿瘤分子靶向/抗肿瘤药物/肿瘤相关分子机制等)、免疫及炎症(免疫性疾病如哮喘、关节炎、过敏性腹泻等)、干细胞(干细胞示踪和存活/肿瘤干细胞)、神经(神经胶质瘤及其药物靶向/中枢神经损伤/髓鞘损伤和修复等/斑马鱼发育等)、材料学(纳米材料的代谢和在体分布/纳米材料毒理学等)。设备优势:气体麻醉:安全,方便灵活,麻醉和苏醒时间快1-2min,麻醉状态易调节、稳定。应用广泛:可满足不同研究的使用,不论是生物发光还是荧光标记均可以进行检测;满足从活体水平到细胞以及基因表达的实时监测。极高灵敏度:高灵敏度的制冷CCD镜头,可达到零下-90°C,使体内发出的非常少的光子也能够检测到。其中,酶和底物的发光具有极高的特异性,所以生物发光具有更高的特异性,灵敏度比荧光的灵敏度高104倍。可检测到小鼠皮下甚至个位数个细胞。信噪比高:绝对密封的暗箱装置,可以屏蔽包括宇宙射线在内的所有光线。其感光的动态范围大于11个数量级, 信噪比高。穿透性强:对于小鼠的穿透性可达到3-4CM,可检测肺部深层的信号。免疫学实验室



  • 细胞的外源基因导入及分析分选技术:最系统的电穿孔技术及流式分析分选

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    (1)Lonza Nucleofector 2b 电穿孔仪该设备采用物理性的电穿孔转染方法,结合传统的电穿孔技术及专利的细胞特异性细胞核转染液,针对不同细胞类型调整优化电转参数(内存优化转染程序),直接把外源基因导入原代细胞和传代细胞的细胞核中。与其他转染技术相比,Nucleofector核转染仪特别适用于转染原代细胞、悬浮细胞和难以转染的细胞系,如T、B淋巴细胞、NK细胞及PC-12细胞系等。Nucleofector技术是独一无二的,因为它可以直接将DNA转染到细胞核内,实现了因受到细胞分裂限制的原代细胞的高效率转染。使用Nucleofector核转染仪可以在肿瘤研究、免疫学、组织工程学及心血管疾病研究领域中轻易获得大于90%的高效率基因转染率。同时,Lonza还拥有全球共享的细胞转染数据库,以及超过150种不同类型细胞的转染程序。优化的操作步骤使得操作快速便捷。


    (2)高通量流式转染仪(Lonza AMAXA 4D-Nucleofector LV电转仪)该设备除了具备Nucleofector 2b 电转染的特点外,还配有LV单元,可实现对大规模细胞的高通量转染,一次对高达5×109的细胞量进行转染,整个转染过程仅为几分钟。该大规模、高通量转染设备是淋巴、NK细胞治疗,CHO、293细胞表达蛋白,高容量细胞展示库构建等实验应用的最佳设备。


    (3)多色分析及分选仪器——BD FACSAria IIBD FACSAria II细胞高速分选仪融合了全新的设计理念和高度智能化的软件系统,使得多色分析和高速分选的操作高度自动化,在复杂的分选操作技术简单化的同时更保证了实验结果的准确性,高速分选的高效性。该设备细胞分选速度可达70,000细胞/秒,支持六根激光器和四个独立光斑。可选的激光器包括:633 nm, 561 nm, 488 nm, 445 nm, 405 nm和375nm。该设备还可同时进行20个参数、18色的检测,具有着强大的灵活性。


    免疫学实验室

  • 基因表达差异检测及痕量基因定量分析技术:数字PCR及Real-time PCR

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    (1)微滴式数字PCR——QX200QX200系统所应用的数字PCR技术是全面超越第二代PCR技术——实时荧光定量PCR(real-time PCR,QPCR)技术的第三代PCR技术。A.优越的仪器性能:绝对定量:可直接“数”出核酸靶分子数量,做到真正绝对定量;无需外参标准品及标准曲线准确性高:不依赖PCR效率,抑制剂耐受度高,模板适用度广分辨率高:可识别低至6%的基因浓度差异灵敏度高:可检测单拷贝基因,适合单细胞基因表达、病原微生物及低频突变检测重复性好:数据重复性远好于real-time PCR差异对比精准:多种基因同一体系检测,基因差异对比精确度、准确度高兼容染料法和探针法:应用面广,同时可解决探针法非特异性问题及染料法引物二聚体问题


    (2)实时荧光定量PCR仪——CFX Connect 实时荧光定量PCR技术是具有里程碑意义的技术,它实现了PCR从定性到定量的飞跃。在本实验室的基因定量分析体系中,实时荧光定量PCR不仅完成胜任常规PCR实时定量分析工作,还被用于数字PCR系统的条件探索及初筛分析。CFX Connect系统主要功能和优点功能全面:系统具有创新光学设计及强大的数据分析软件,能满足所有荧光定量 PCR 需求双目标多路测定:可区分单个反应孔中的两个目标,同时进行两个目标基因的分析快速热循环:完善的热循环系统,缩短从设置到结果的时间,实验方案自动编写,温度梯度优化,快速升降温使达到 PCR所需时间达到最短。快速扫描:比其它仪器更快地完成 SYBR Green I 和单色 FAM 扫描,从所有 96 个孔读取单通道荧光只需 3 秒钟可操作荧光共振能量转移 (FRET):系统的光学快门包括一个含有 LED 滤波光电二极管组合的通道,专用于 FRET 单链体试验


    免疫学实验室

  • 蛋白-蛋白及蛋白-小分子相互作用检测技术:最灵敏的分子相互作用仪

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           T200表面等离子共振生物分子相互作用分析仪代表着当代分子间相互作用分析技术的科技前沿。它是一种万用的、无标记系统,具有高灵敏、分子所需量少、高通量等优点,是研究分子间相互作用的金标准设备,已广泛应用于蛋白质、核酸、多肽、小分子化合物等生物分子相互作用的研究之中。作为一种新的高端仪器,它可以实时地提供高质量动力学、亲和性、特异性、选择性以及热动力学作用数据,尤其是其分子量0道尔顿的检测下限可以涵盖所有药物小分子,具有其它仪器设备无法比拟的优势。

    免疫学实验室

    Biacore T200系统主要功能和优点

    ² 适用范围广:万用的、无标记系统,适用范围从早期药物开发研究到开发,直至质量控制。

    ² 综合鉴定:系统提供高质量动力学、亲和性、浓度、特异性、选择性以及热动力学作用数据。

    ² 极高的灵敏度:检测下限为0道尔顿,确保对最小有机成分的精确亲和性分析。

    ² 实时、动态:分析均实时地完成,可展现整个作用过程的数据。

    ² 可控性高:支持使用96孔和384孔微孔板以及试瓶;可同时对四种相互反应进行监测;样本仓可冷却至4摄氏度;可进行样品回收(垂钓功能)。

    ² 应用研究领域:理解分子机理以及结构-功能关系;定义潜在的药靶和诊断标记物;选择和鉴定生物疗法候选药;药物开发过程中选择和优化前导成分;免疫原性研究中检测和鉴定耐药性抗体


     

  • 蛋白表达与纯化制备技术:原核表达制备和哺乳动物细胞表达制

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           本特色技术采用AKTA蛋白纯化仪的高端版本仪器,可以同时接驳5个层析柱,做到配液、进样、收集、分析全自动化,特别适合蛋白纯化条件优化的探索工作。基于该设备和全套预装的离子交换柱、分子筛、疏水柱,可快速开展生物大分子的高分辨率的纯化,并完成从实验室基础研究到整个工艺方法快速开发及放大。目前实验室已经建立了一系列天然蛋白质和重组蛋白的纯化方法,可纯化不同来源的重组蛋白或天然蛋白,获得高纯度蛋白质。

    免疫学实验室






  • 多种疼痛的实验动物造模、行为学评价、致痛及镇痛相关物质检测的技术

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           中医药治疗疼痛具有悠久的历史、翔实的理论基础和丰富的临床经验,特别是在毒副作用、成瘾性等方面与现有的西药镇痛剂相比有较大的优势,但由于缺乏适合中医药研究的现代医学方法和手段揭示其科学内涵,疗效的机制难以阐明。本实验室以与诺贝尔医学及生理学奖评选机构—瑞典卡罗林斯卡医学院共同进行国际合作课题为契机,引进、建立了光化学诱导的神经源性疼痛的SSNI、TN等临床预测性较好的动物模型及相关实验技术,筛选并发现了治疗神经源性疼痛的有效中药及其成分,申请并获批了专利。进而,又建立了转移性骨癌痛、癌侵袭痛等大、小鼠动物模型,并研究了该类药物对癌性疼痛的作用和机制。目前,疼痛及镇痛的相关研究技术方法已为实验室人员熟练掌握,一个疼痛和镇痛的中医药实验研究平台已经形成。

    微透析实验室



  • 对于药代动力学研究具有独特优势的自动采血及其检测技术

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           自动采血系统可以在清醒、自由活动的动物体内定时、定量、定速的进行血液的样品采集,消除了人员抽血时对动物造成的紧张感,保证血液样本质量的精确和再现性,并且在采血后可自动等量补液,实现在一只动物体内长时间、多次采血而较少影响动物生理状态,避免了以往操作方法引起的外周循环血量下降以致休克的状况。配合科室微透析采样和检测系统,尚可实现血液-靶组织多种化学物质长时间、同步地动态观察,在药代动力学、药代-药效结合研究、时辰药理学、中药归经理论等研究中具有独特的优势。

    微透析实验室







    小动物自动采血系统优势:电脑控制流体输送,确保按时收集采血管中段纯血样本并确保采样容量;低漏失模式,采血管中稀释血及与采血等容量的生理盐水补回体内,最大程度减少失血;采血时无人工操作,降低取血过程中动物紧张性,保证良好生命状态;多台仪器同时用于实验完成取血,平行性好、实验误差小。

  • 适用于延缓衰老、抗PD药物筛选及机制研究的线虫培养、观察、检测技术

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            秀丽隐杆线虫(nematode Caenorhabditis elegans)(以下简称为线虫)作为模式动物用于实验研究具有以下优点:①线虫共有8 个多巴胺神经元,4个cephalic cells (CEPs),2 个anterior deirids (ADEs),2 个posterior deirids(PDEs),可以通过转基因GFP显示出来,容易在荧光显微镜下直接观察病理变化;②线虫和人在基因和分子通路方面保守,多数基因与人类同源;③在神经系统方面,大部分哺乳动物中多巴胺信号通路的基因和线虫中的相关基因保守,如cat-2、cat-4、dat-1等;神经递质转运体(如乙酰胆碱转运体VChAT,多巴胺转运体DAT等)保守;④世代周期短,适于衰老相关模型的制备,便于快速观察实验结果;⑤后代数目多,适合统计分析;⑥分子遗传技术成熟,基因编辑及基因沉默等实验可行性好。

            项目组成员自2006年开始一直以线虫为研究对象开展延缓衰老及防治帕金森的药物发现及分子机制的相关研究,建立了多种衰老及帕金森病线虫模型及检测方法,搭建了以线虫这一模式生物从事相关工作的技术平台。基于以上研究工作,实验室已申请4个发明专利。

    微透析实验室



    1. 线虫多巴胺神经元绿色荧光图和明场图


    2. 药物干预促进线虫CEP多巴胺神经元树突生长(对照组线虫转入致病基因导致CEP多巴胺神经元树突缺失)


    3. 基于帕金森病线虫(转基因及药理)模型的药物筛选及靶点发现的实验流程图


    4. 中药延缓线虫衰老的药效学及分子机制研究流程图



  • 适用于整体、动态实验研究的大、小鼠多位点微透析采样及其检测技术

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           采用微透析结合HPLC-电化学/紫外/荧光及其他生化检测技术,可以在动物清醒、自由活动状态下,同步进行多个位点的取样及分析,所获得的数据直接反映靶部位发挥生理病理作用的、游离于细胞外液的微量化学物质的信息。目前,已成功建立了疾病相关的大鼠纹状体细胞外液乙酰胆碱下降的模型、大鼠纹状体细胞外液羟自由基升高的模型、大鼠纹状体细胞外液氨基酸类递质紊乱的模型等;建立了微透析液中微量儿茶酚胺类神经递质及其代谢产物、羟自由基指标、乙酰胆碱、胆碱、多种兴奋性和抑制性氨基酸类递质水平,葡萄糖、乳酸、丙酮酸、甘油、尿素等能量代谢相关指标的检测方法等。适用神经退行性疾病、心脑血管疾病、疼痛的发病机制及药理研究,在经络实质、针灸原理、脏象、证候病机和中药药理等研究中亦有独到之处。

    微透析实验室



    小鼠、大鼠脑立体定位及清醒、自由活动状态下微透析取样


    微透析样品中多种微量化学物质的HPLC及生化检测

  • 新药及保健食品研发技术

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          长期致力于各类剂型工艺研究、质量标准等药学类研究。已经与国际、国内著名研究机构和制药公司如:Coca calo、烟台巨先药业、中科乐人(北京)科技有限公司、江西青峰药业、山东吉生源药业、吉林一正药业等大型企业或上市公司建立产学研合作联盟,作为年轻机构完成10余项保健食品、新药的开发工作,注重先进技术体系的建立应用和相关基础理论研究,在促进新药产学研结合中发挥重要作用。带动企业提升创新能力。


    物质分析检测实验室



  • 代谢动力学研究技术

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           代谢动力学是中医药研发链条中的重要环节,贯穿中医药研究过程的始终,目前的主要研究领域包括:申报临床试验开展的创新药物临床前药代研究及其他类新药药代研究;中药制剂产品药代研究;探明各物质成分的代谢性质及限制因素,以阐明中医药疗效的物质基础;开展体外吸收试验、体外代谢试验、药物动力学筛选、代谢稳定性筛选,以预估单体成分的成药性;复方配伍或多种药物同时使用时,通过药物动力学研究检测药物间的相互作用,可以设法避免或降低药物间的不良反应;开展仿制药一致性评价、药代动力学、生物等效性等新药研发工作。该项目获得了国家自然基金等各级课题的支持,并开展对外服务工作。
    物质分析检测实验室





  • 中医药代谢组研究技术

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           采用整体性的代谢组学方法与中医整体观念相结合的研究思路,利用LC-MS/MS 技术和多种不同类型的数据分析方法,建立了系统的代谢组学分析方法,将其用于中药复方疗效评价及中药质量控制的研究中。       如基于代谢组学分析方法对中药复方疗效和机制探讨研究中,筛选出与心力衰竭诊断和参附汤疗效评价密切相关的潜在小分子生物标志物(组),采用多类型数据挖掘方法对这些小分子标志物进行相关网络分析,从而对心衰疾病及参附汤治疗机制进行了探讨。其中发表在Journal of Chromatography A(影响因子4.258)的研究成果,被审稿人评价为对中药复方研究具有显著的重要性和新颖思路。物质分析检测实验室

  • 中医药网络药理学研究技术

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           综合应用药物分析技术和网络药理学方法,检测中药材、中药制剂的化学成分,筛选中药材、中药制剂的潜在活性成分,预测相关疾病的作用靶点,探讨中药治疗目标疾病的作用机制。通过构建中药方剂“化学成分-作用靶标-疾病靶标-PPI 网络”多维网络,从分子层次阐释中药方剂作用原理。应用于中药药效、作用原理;方剂配伍的科学内涵;中药药性与疗效的相关性;药物的新适应症的重新定位等相关领域的研究,中药材质量控制标准(质量标志物)研究。首次建立中药抗菌机制的网络药理学方法建立,并开展中药干预胃轻瘫、脑梗塞等疾病的作用机制和组方配伍合理性研究,为各级课题和制药单位提供了服务。基于对相关中药制剂的深度研究提升企业的创新能力和市场延伸。
    物质分析检测实验室